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簡要描述:產(chǎn)品簡介:產(chǎn)品品牌:Roche羅氏產(chǎn)品貨號:064027 12001產(chǎn)品名稱:FastStartEssentialDNAGreenMaster(Roche)產(chǎn)品規(guī)格:5×100反應(yīng)(20μl)Roche Fast Start Essential DNA Green Master
品牌 | Roche/羅氏 | 貨號 | 064027 12001 |
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規(guī)格 | 5×100反應(yīng)(20μl) | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 適合用于基因檢測和定量的熱啟動PCR分析。 |
Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster(Roche)
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羅氏Roche總部位于瑞士巴塞爾,是全球在醫(yī)藥和診斷領(lǐng)域,致力于研究并處于領(lǐng)xian地位之一的保健集團。羅氏的診斷部門提供了du一無二的產(chǎn)品品種,為quan世界的研究人員、醫(yī)師、病人、醫(yī)院和實驗室提供多樣化的創(chuàng)新測試產(chǎn)品及服務(wù)。羅氏診斷在全球有近19,000人員正致力于科研、發(fā)展、產(chǎn)品的市場運作和服務(wù)以及一體化的解決方案。
Roche Fast Start Essential DNA Green Master
Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster(Roche) 5×100反應(yīng)(20μl),產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品品牌:Roche羅氏
產(chǎn)品貨號:064027 12001
產(chǎn)品名稱:FastStartEssentialDNAGreenMaster(Roche)
產(chǎn)品規(guī)格:5×100反應(yīng)(20μl)
Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster(Roche) 5×100反應(yīng)(20μl),產(chǎn)品說明:
FastStart Essential DNA Green Master是一種現(xiàn)成的反應(yīng)混合物,使用LightCycler®Nano和LightCycleer®96儀器上的SYBR Green I檢測格式。用于8管條或單管中的熱啟動PCR。熱啟動PCR通過*小化反應(yīng)開始時非特異性擴增產(chǎn)物的形成,顯zhu提高了PCR的特異性和min感性。
應(yīng)用
FastStart Essential DNA Green Master提供試劑,包括SYBR Green I染料,用于使用LightCycler®96儀器和LightCycleer®Nano儀器擴增和檢測DNA。該試劑盒非常適合用于基因檢測和定量的熱啟動PCR分析。
PCR產(chǎn)物的產(chǎn)生可以通過SYBR Green I熒光信號的測量來檢測。SYBR Green I染料插入DNA螺旋(Zipper,H.等人,2004)。在溶液中,未結(jié)合的染料顯示很少的熒光;然而,熒光(波長,530nm)在DNA結(jié)合時大大增強。因此,在PCR期間,SYBR Green I熒光的增加與產(chǎn)生的雙鏈DNA的量成正比。由于SYBR Green I染料非常穩(wěn)定(在30個擴增周期中僅損失6%的活性),并且LightCycler®96儀器的光學(xué)系統(tǒng)與激發(fā)和發(fā)射波長相匹配,因此它是測量總DNA時的shou選試劑。
在LightCycler®96系統(tǒng)上實時PCR期間,SYBR Green I檢測DNA的基本步驟如下:
在擴增開始時,反應(yīng)混合物包含變性DNA、引物和染料。未結(jié)合的染料分子微弱地發(fā)出熒光,產(chǎn)生*小的背景熒光信號,該信號在計算機分析期間被減去。
引物退火后,少數(shù)染料分子可以與雙鏈結(jié)合。DNA結(jié)合導(dǎo)致SYBR Green I分子在激發(fā)時發(fā)光的顯著增加。
在伸長過程中,越來越多的染料分子與新合成的DNA結(jié)合。如果連續(xù)監(jiān)測反應(yīng),則實時觀察熒光的增加。在下一個加熱周期DNA變性后,染料分子被釋放,熒光信號下降。
在每個PCR周期的延伸步驟結(jié)束時進行熒光測量,以監(jiān)測擴增DNA的增加量。
為了證明只擴增了所需的PCR產(chǎn)物,您可以在PCR后進行熔化曲線分析。在熔化曲線分析中,反應(yīng)混合物緩慢加熱至95°C,這導(dǎo)致雙鏈DNA熔化,SYBR Green I熒光相應(yīng)降低。儀器持續(xù)監(jiān)測這種熒光降低,并將其顯示為熔化峰。每個熔化峰代表特定DNA產(chǎn)物的特征熔化溫度(Tm)(其中DNA為50%雙鏈和50%單鏈)。決定dsDNA Tm的*重要因素是該片段的長度和GC含量。如果PCR僅產(chǎn)生一個擴增子,熔化曲線分析將僅顯示一個熔化峰。如果存在引物二聚體或其他非特異性產(chǎn)物,它們將顯示為額外的熔化峰。因此,檢查PCR產(chǎn)物的Tm可以與在凝膠電泳中通過長度分析PCR產(chǎn)物進行比較。
此產(chǎn)品的工作原理
FastStart Essential DNA Green Master是一種即用即用的反應(yīng)混合物,專門設(shè)計用于在LightCycler®480 Multiwell Plates 96中應(yīng)用SYBR Green I檢測格式,或在LightCycler®96儀器上應(yīng)用LightCycler®8-管條(白色)。用于執(zhí)行熱啟動PCR。熱啟動PCR已被證明通過*小化反應(yīng)開始時非特異性擴增產(chǎn)物的形成,顯著提*了PCR的特異性和min感性(Chou,Q.等人,1992,Kellogg,D.E.等人,1994,Birch,D.E.,1996)。FastStart Taq DNA聚合酶是一種化學(xué)修飾形式的耐熱重組Taq DNA多聚酶,在75°C以下無活性。這種酶只有在高溫下才有活性,此時引物不再非特異性結(jié)合。在循環(huán)開始之前,酶在單個預(yù)培養(yǎng)步驟(95°C,5至10分鐘)中被wan全激活(通過去除阻斷基團)。激活不需要其他熱啟動技術(shù)典型的額外處理步驟。
Roche Fast Start Essential DNA Green Master
產(chǎn)品訂購信息:
Roche羅氏 064027 12001 FastStartEssentialDNAGreenMaster(Roche) 5×100反應(yīng)(20μl)
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